|
Cytometr spektralny ID7000 firmy SONY umożliwia analizę markerów powierzchniowych komórek oraz pęcherzyków zewnątrzkomórkowych (ang. Extracellular vesicles – EVs). Jako rezultat uzyskuje się informację odnośnie procentowej zawartości danego markera na powierzchni komórek lub też EVs. Ze względu na wyposażenie cytometru w 4 lasery możliwa jest analiza ok. 20 markerów na powierzchni komórek jednocześnie. Dodatkową przewagą posiadanego cytometru jest detekcja od 150nm, krótki czas pomiaru oraz niewielka ilość wymaganej próbki. |
Aktualnie prowadzone są badania na:
- Komórkach z hodowli 2D;
- Komórkach wyizolowanych z hodowli 3D (izolacje ze sferoidów średnicy 1-2mm);
- Komórkach izolowanych z próbek krwi;
- Pęcherzykach zewnątrzkomórkowych.
Specyfikacja sprzętu:
- 4 lasery: 405 nm, 488 nm, 561 nm, 637 nm
- Wykrywalna wielkość cząstek: 160nm na SSC
- Częstotliwość zdarzeń: 40 000 zdarzeń na sekundę
- Natężenie przepływu próbki : ~33 μL/min–200 μL/min
- Minimalna objętość próbki: 100 μl w trybie standardowym/50 μl w trybie małej objętości
- Obsługiwane typy plików: exdat i FCS 3.1
- 24-pozycyjny stojak na probówki 12 x 75 mm (5 ml)
- Regulacja temperatury: od temperatury otoczenia do 4°C za pomocą modułu chłodzenia próbek Peltiera
Próbki zanalizowane przy użyciu cytometru spektralnego ID7000 można wykorzystać do pomiarów z wykorzystaniem cytometru obrazowego Celigo (próbki przygotowane z komórek, nie EVs), bądź też do posortowania komórek z wykorzystaniem sortera komórkowego firmy SONY (laser 488nm).
Dotychczas przeprowadzone badania skupialy się na:
- Charakterystyce wyizolowanych pęcherzyków zewnątrzkomórowych (analiza CD63, CD9, CD81, anneksyna V);
- Charakterystyce komórek PBMC wyizolowanych z krwi pacjentów cierpiących na schorzenia układu krążenia (analiza CD34, CD45, CD145);
- Analizie komórek wyizolowanych z komórek sferoidów wytworzonych w reaktorze ClinoStar (ocena żywotności oraz ekspresji markerów powierzchniowych np. CD145).
